Devlopman yon metòd ELISA endirèk pou deteksyon kowonaviris sendwòm dyare egi kowonaviris IgG ki baze sou pwoteyin Spike recombinant.

Kowonaviris sendwòm dyare egi kochon (SADS-CoV) se yon kowonaviris patojèn enterik kochon ki fèk dekouvri ki ka lakòz dyare dlo nan porsele ki fèk fèt epi ki ka lakòz gwo pèt ekonomik nan endistri kochon an.Kounye a, pa gen okenn metòd serolojik ki apwopriye pou evalye efikasite enfeksyon ak vaksen SADS-CoV, kidonk gen yon bezwen ijan pou itilize yon tès imunosorban ki lye ak anzim (ELISA) efikas pou fè defisi sa a.Isit la, yo te konstwi yon plasmid recombinant ki eksprime SADS-CoV Spike (S) pwoteyin fusion ak domèn IgG Fc imen pou pwodui baculovirus recombinant epi eksprime nan selil HEK 293F.Pwoteyin S-Fc la pirifye ak rezin pwoteyin G epi li kenbe reyaksyon an ak antikò anti-moun Fc ak anti-SADS-CoV.Lè sa a, S-Fc pwoteyin te itilize pou devlope endirèk ELISA (S-iELISA) ak optimize kondisyon reyaksyon S-iELISA.Kòm yon rezilta, lè yo analize valè OD450nm nan 40 SADS-CoV sera negatif konfime pa tès imunofluoresans (IFA) ak Western blotting, yo te detèmine valè koupe a se 0.3711.Koefisyan varyasyon (CV) nan 6 SADS-CoV sera pozitif nan ak ant kouri nan S-iELISA yo tout te mwens pase 10%.Tès kwa-reaktivite a te montre ke S-iELISA pa gen okenn kwa-reaktivite ak lòt viris porsin sera.Anplis de sa, ki baze sou deteksyon an nan 111 echantiyon serom klinik, to a konyensidans an jeneral nan IFA ak S-iELISA te 97.3%.Tès netralizasyon viris la ak 7 valè OD450nm diferan nan serom te montre ke valè OD450nm detekte pa S-iELISA te korelasyon pozitivman ak tès netralizasyon viris la.Finalman, S-iELISA te fèt sou 300 echantiyon serom fèm kochon.Twous komèsyal lòt enterovirus pòsin yo te montre ke pousantaj pozitif IgG SADS-CoV, TGEV, PDCoV ak PEDV te 81.7%, 54%, ak 65.3%, respektivman., 6%, respektivman.Rezilta yo montre ke S-iELISA a espesifik, sansib, ak repwodiktif, epi yo ka itilize pou detekte enfeksyon SADS-CoV nan endistri kochon an.Atik sa a pwoteje pa copyright.tout dwa rezève.


Tan poste: Jun-22-2021